shRNA慢病毒表达载体定制服务
RNA 干扰(RNA interference,RNAi)是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象,它是指当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链 RNA(dsRNA)时,靶基因mRNA发生降解而导致基因表达沉默过程。由于RNAi具有高度的序列专一性和有效的干扰,可以特异地将特定的基因沉默, 从而获得基因功能丧失或基因表达量的降低,这种技术已经成为研究基因功能的重要工具,并将在病毒病、遗传性疾病和肿瘤病的治疗方面发挥重要作用。
短发卡RNA (shRNA) 是可以克隆到表达载体并表达短的干扰RNA (siRNA, 19-21个核苷酸的RNA 双链)的DNA分子。可根据靶基因设计短发卡RNA (shRNA)序列并将其克隆入干扰表达载体上。转入细胞实现对目的基因的沉默作用,来研究基因功能及靶点筛选。我们应用RNAi Designer软件平台,可对靶基因序列进行干扰位置效应评价和序列同源型分析,完成shRNA/micRNA等多种序列的设计,并提供一站式RNAi解决方案。
技术特点
技术平台:shRNA-GFP病毒表达载体,筛选基因;
构建好的shRNA表达载体,可直接用于脂质体转染靶细胞进行RNA干扰操作;
对于难转染的细胞或者建构建沉默细胞模型,可直接包装成慢病毒后再侵染靶细胞,施药物筛选;
服务流程
针对靶基因设计shRNA序列,合成该序列并退火生成双链DNA。
shRNA表达载体构建。
转化挑取提取质粒测序
干扰质粒,甘油菌种制备(包括阴性对照),完整实验报告。
客户提供
靶基因在GeneBank 中的序列号
提供结果
一套shRNA表达载体质粒和相应的甘油菌,实验报告。
注:序列测定结果符合设计要求,在脂质体转染效率>80%条件下,通过Q-PCR检测至少保证其中一条shRNA对靶基因表达有干扰效果。
shRNA表达载体服务订购
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