酵母文库构建技术服务

酵母双杂交及其衍生技术已被广泛应用于蛋白质组学、细胞信号转导和功能基因组学等领域，成为分子生物学研究领域的重要实验手段，研究人员通过该技术揭示了大量已知或者未知蛋白相互作用的分子机制。运用gateway和smart两套建库体系，在构建核体系酵母文库和膜体系酵母文库均有丰富的经验，通过多道工序，严格把控质量。文库质控：平均插入片段＞1200bp；文库原始库容量＞1*107CFU；文库空载率＜5%。

服务优势

质量管理体系完善，严格把控多道工序，多轮质控，项目经验丰富，保证质量可靠性。

周期短,20个工作日完成建库，比传统实验方式节省35%的周期。

下游技术服务衔接, GST pull down、BiFC、 Co-IP等多方面配套服务。

原理

酵母双杂交系统是基于对真核细胞调控转录起始过程的认识的基础上而建立的。基因的表达由转录激活因子来激活，转录激活因子必须依靠DNA结合区 (BD) 和激活区(AD)这两个结构域来发挥作用。BD或AD单独作用不能激活转录反应，但当两者在上游较为接近时则呈现完整的转录因子活性，启动下游基因的表达。因此，将DNA- BD序列与已知的蛋白质X (诱饵蛋白)融合，构建BD-X融合表达载体，将AD与拟研究的蛋白Y (Prey) 或基因片段、cDNA 文库融合，构建AD-Y融合表达载体，然后把这两个融合表达载体同时导人酵母细胞中，如果X蛋白和Y蛋白可相互作用，则可使BD和AD在空间上相互接近形成-一个有效的转录激活因子，从而激活UAS ( upstream activating sequence)下游启动子，启动下游报告基因的表达，反之，BD与AD就不能结合，报告基因也不能被启动表达。