双分子荧光互补（BiFC）服务

双分子荧光互补（BiFC）是利用荧光蛋白的特点来研究蛋白的相互作用。荧光蛋白可从特定的位点被分开，产生两个非荧光活性片段。当两片段分别被融合到相互作用的蛋白上时，会因蛋白的相互作用力而被拉近、发生互补从而重新构建成有活性的荧光蛋白并在激发光下产生荧光。因此利用荧光显微镜就可以直接通过观察荧光有无来判断蛋白是否发生相互作用。

实验原理

外源片段插入荧光蛋白家族（YFP、GFP、Luciferase等）的特异性位点不会影响GFP的荧光活性，基于此特性，该技术将它们分为两个非荧光蛋白片段，即N片段和C片段。当两种相互作用的蛋白质分别与N片段和C片段连接时，它们形成融合蛋白并在活细胞中一起表达。光蛋白的N端和C端片段可以彼此靠近并形成活性荧光基团以发出荧光。

技术特点

1、在活细胞生理环境中直接、原位显示蛋白质相互作用产物。

2、不同的双分子荧光复合物之间的光谱差异能够满足以不同的颜色在同一细胞中同时显示多种蛋白质间相互作用的需要。

3、双分子荧光复合物的形成不需要外加底物和辅助因子，使蛋白质相互作用的检测对细胞的干扰降低到最低程度。

4、bifc具有的灵敏度足以检测与内源性表达水平相当的蛋白质间的相互作用，从而使实验结果更真实的反映天然蛋白的特性。

5、除普通荧光显微镜外，利用bifc进行蛋白质相互作用分析不需要特殊仪器，实验结果也不需要进行复杂的数据处理或荧光校正。

服务内容